影響反響要素較多，特別是固相載體的包被難達到各個體之間的共同，因此在定量測定中，每批測驗均須用一系列不同濃度的參考規范品在相同的條件下制造規范曲線。以下就是上海通蔚生物的詳解：
測 定大分子量物質的夾心法ELISA試劑盒，規范曲線的范圍一般較寬，曲線點的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數紙，以檢測物的濃度為橫坐標，以吸 光度為縱坐標，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平整，中央較呈直線的部分是理想的檢測區域。在實驗條件(包含試劑)較難 保證恒定的情況下，這種判別法較為合適。
在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值后，核算S/N值。也有寫作P/N的，這里的P不代表陽 性ELISA試劑盒(positive)，而是患者(patient)的縮寫，不應誤解。為避免混雜，更宜用S/N表明。在前期的間接法ELISA中，有 些作者定出S/N為陽性規范，現多為各種測定所沿襲。實際上每一測定體系應該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應留意的是，N所代表的陰性對照是不含受檢 物質的人血清。
有的ELISA試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質或蛋白質含量較底的緩沖液，致使反響后產生的本底可能較正常人血清的本底 低得多。定性測定的結果判別是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗 出"有"或"無"的簡單回答，分別用"陽性"、"陰性"表明。"陽性"表明該標本在該測定體系中有反響。"陰性"則為無反響。用定性判別法也可得到半定量 結果，即用滴度來表明反響的強度，其實質仍是一個定性實驗。在這種半定量測定中，將標本作一系列稀釋后進行實驗，呈陽性反響的稀釋度即為滴度。依據滴 度的凹凸，能夠判別標本反響性的強弱，這比觀察不稀釋標本呈色的深淺判別為強陽性、弱陽性更具定量意義。 在間接法和夾心法ELISA試劑盒中，陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA試劑盒中則相反，陰性孔呈色深于陽性孔。兩類反響的結果判別方法不同，分 述于下。
